Обзор
Икатибанта ацетат — это специфический препарат для лечения гемангиоидной ангиомы (ГАЭ), разработанный компанией Shire и получивший одобрение FDA 25 августа 2011 года для лечения острых эпизодов наследственного ангионевротического отека у взрослых в возрасте 18 лет и старше. Это также третий препарат, одобренный FDA для лечения приступов НАО. Икатибанта ацетат имеет структуру, аналогичную брадикининоподобному d-декапептиду, но содержит пять аминокислот небелкового происхождения. Он действует как мощный селективный конкурентный антагонист рецепторов брадикинина 2 типа (В2), облегчая местный отек, воспаление и боль, связанные с эпизодами НАО, путем ингибирования эффектов брадикинина. НАО представляет собой лишь одно из нескольких потенциальных показаний, при которых может быть показан икатибант; другие потенциальные применения включают астму, цирроз печени и другие виды ангионевротического отека. Следовательно, икатибанта ацетат демонстрирует значительную терапевтическую ценность и широкие рыночные перспективы.
Формула химической структурыИкатибанта ацетат
EсущественныйIинформация
Китайское имя:醋酸艾替班 фото
Английское название: Икатибант ацетат.
Идентификатор компании：GT-F005
КАС：138614-30-9；130308-48-4
Sсерийный номер：HD-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH
Mолекулярная формула：C59H89N19O13S
Mмолекулярная масса：1304.52
Икатибанта ацетат МС-спектр
Синтетический маршрут
1. Приготовление смолы Fmoc-Arg(Pbf)-CTC.
Добавляют 11,1 г 2-хлортрифенилметилхлоридной смолы со степенью замещения 0,9 ммоль/г в колонку для твердофазной реакции с последующим добавлением набухшей в ДМФА смолы в течение 30 минут. Добавить 3,50μл DIPEA к 12,98 г Fmoc-Arg(Pbf)-OH и активируют в течение 5 минут; затем добавьте набухшую в ДМФА смолу и дайте смеси достичь равновесия через 10 минут. Добавьте еще 3,50μл DIPEA, реагировать при комнатной температуре в течение 45 минут и, наконец, герметизировать метанолом на 20 минут. Реакционную смесь выпаривают, промывают три раза ДМФ, три раза ДХМ, а затем трижды сжимают метанолом в течение 3 минут, 5 минут и 8 минут соответственно, получая смолу Fmoc-Arg(Pbf)-CTC с измеренной скоростью замещения 0,5 ммоль/г.
2：Муфта из Фмок-Ойк-ОЙ
Взвесьте 10 ммоль смолы Fmoc-Arg (Pbf)-CTC и добавьте ее в твердофазный реактор, набухайте в ДМФ в течение 0,5 ч, затем дважды снимите защиту Fmoc, используя 20% раствор DBLK, в течение 10 мин и 5 мин соответственно; после промывки конъюгируйте его с Fmoc-Oic-OH. Растворите 11,73 г Fmoc-Oic-OH, 4,9 г HOBt и 6,1 мл DIC в ДХМ (для солюбилизации можно добавить небольшое количество ДМФ), активируйте смесь на бане с ледяной водой в течение 7 мин, затем перенесите ее в твердофазный реактор и проведите реакцию при комнатной температуре в течение 1–2 ч. Конечную точку реакции определяют индантронным методом. По завершении аспирируют реакционную смесь, промывают ДМФ, дважды удаляют защиту Fmoc с помощью 20% раствора ДБЛК в течение 10 мин и 5 мин соответственно, снова промывают и готовят к связыванию со следующей аминокислотой.
3：Муфта из Фмок-D-Цит-ОЙ
Растворите 11,91 г Fmoc-D-Cit-OH, 5,00 г HOAt и 11,4 г HATU в ДХМ (с добавлением небольшого количества ДМФ для солюбилизации). Добавьте 3,87 г DIPEA под баню с ледяной водой и активируйте на 7 минут; затем переносят смесь в твердофазный реактор и проводят реакцию при комнатной температуре в течение 1–2 часа. Завершение реакции определяют индиольным методом. По окончании реакции реакционную смесь удаляют, промывают ДМФ и удаляют Fmoc-защиту 20% раствором ДБЛК. После промывки подготовьтесь к связыванию со следующей аминокислотой.
4：Муфта из Фмок-Сер(тБу)-ОЙ
Растворите 11,49 г Fmoc-Ser(tBu)-OH, 5,00 г HOAt и 6,1 мл DIC в ДХМ (с добавлением небольшого количества ДМФ для солюбилизации). После активации на водяной бане со льдом в течение 7 минут смесь переносят в твердофазный реактор и проводят реакцию при комнатной температуре в течение 1–2 часа; Завершение реакции определяют индиольным методом. По завершении удаляют реакционную смесь, промывают ДМФ, затем устраняют защиту Fmoc с помощью 20% раствора ДБЛК с последующей промывкой перед переходом к связыванию со следующей аминокислотой.
5：Муфта из Фмок-Ти-ОЙ
Растворите 11,79 г Fmoc-Thi-OH, 5,00 г HOBt и 11,37 г HBTU в ДХМ (с добавлением небольшого количества ДМФ для солюбилизации). Добавьте 3,87 г DIPEA под баню с ледяной водой и активируйте на 7 минут; затем перенесите смесь в твердофазный реактор и оставьте реакцию при комнатной температуре в течение 1–2 часа. Завершение реакции определяют индиольным методом. По окончании реакции реакционную смесь удаляют, промывают ДМФ и удаляют Fmoc-защиту 20% раствором ДБЛК. После промывки подготовьтесь к связыванию со следующей аминокислотой.
6：Муфта из Фмок-Гли-ОЙ
Растворите 8,91 г Fmoc-Gly-OH, 5,00 г HOBt и 9,63 г TBTU в ДХМ (с добавлением небольшого количества ДМФ для солюбилизации). Добавьте 3,63 г ТМП под баню с ледяной водой и активируйте на 7 минут; затем перенесите смесь в твердофазный реактор и оставьте реакцию при комнатной температуре в течение 1–2 часа. Завершение реакции определяют инданоновым методом. По окончании реакции реакционную смесь удаляют, промывают ДМФ и удаляют Fmoc-защиту 20% раствором ДБЛК. После промывки подготовьтесь к связыванию со следующей аминокислотой.
7：Муфта из Фмок-Гип(тБу)-ОЙ
Растворите 12,27 г Fmoc-Hyp(tBu).–ОЙ, 5,00 г HOAt и 9,66 г TATU в ДХМ (с добавлением небольшого количества ДМФ для солюбилизации). Добавьте 3,63 г ТМП под баню с ледяной водой и активируйте на 7 минут; затем переносят смесь в твердофазный реактор и проводят реакцию при комнатной температуре в течение 1–2 часа. Конечную точку реакции определяют индиольным методом. После завершения реакционную смесь удаляют, промывают ДМФ и устраняют Fmoc-защиту 20% раствором ДБЛК. После промывки подготовьтесь к связыванию со следующей аминокислотой.
8：Муфта из Фмок-Про-ОЙ
Растворите 10,11 г Fmoc-Pro-OH, 5,00 г HOAt и 11,4 г HATU в ДХМ (с добавлением небольшого количества ДМФ для солюбилизации). Добавьте 3,87 г DIPEA под баню с ледяной водой и активируйте на 7 минут; затем переносят смесь в твердофазный реактор и проводят реакцию при комнатной температуре в течение 1–2 часа. Конечную точку реакции определяют индиольным методом. По завершении удаляют реакционную смесь, промывают ДМФ и устраняют защиту Fmoc с помощью 20% ДБЛК. После промывания готовят к связыванию со следующей аминокислотой.
9：Муфта из Фмок-Арг(Пбф)-ОЙ
Растворите 19,44 г Fmoc-Arg(Pbf)-OH, 5,00 г HOAt и 11,4 г HATU в ДХМ (с добавлением небольшого количества ДМФ для солюбилизации). Добавьте 3,87 г DIPEA под баню с ледяной водой и активируйте на 7 минут; затем переносят смесь в твердофазный реактор и проводят реакцию при комнатной температуре в течение 1–2 часа. Завершение реакции определяют индиольным методом. По окончании реакции реакционную смесь удаляют, промывают ДМФ и удаляют Fmoc-защиту 20% раствором ДБЛК. После промывки подготовьтесь к связыванию со следующей аминокислотой.
10：Муфта из Фмок-D-Арг(Пбф)-ОЙ
Растворите 19,44 г Fmoc-D-Arg(Pbf)-OH, 5,00 г HOAt и 11,4 г HATU в ДХМ (с добавлением небольшого количества ДМФ для солюбилизации). Добавьте 3,87 г DIPEA под баню с ледяной водой и активируйте на 7 минут; затем переносят смесь в твердофазный реактор и проводят реакцию при комнатной температуре в течение 1–2 часа. Конечную точку реакции определяют индиолоновым методом. После завершения удалите реакционную смесь, промойте ДМФ, затем используйте 20% ДБЛК для удаления защиты Fmoc. Промывают три раза ДМФ, три раза ДХМ и три раза метанолом для сокращения (в течение 3 мин, 5 мин и 8 мин соответственно) с последующей сушкой в вакууме с получением этибантной пептид-ацетатной смолы.
ВЭЖХ-хроматограмма ацетата икатибанта
11：Пиролиз смолы икатибанта ацетата
Приготовьте 200 мл реагента для лизиса, содержащего 190 мл трифторуксусной кислоты, 6 мл триизопропилсилана и 4 мл воды, и предварительно охладите его в холодильнике в течение 30 минут. Добавьте 20,0 г этибантной пептид-ацетатной смолы в круглодонную колбу емкостью 500 мл, затем добавьте к смоле подготовленные 200 мл лизирующего реагента при перемешивании на ледяной бане и в токе азота. После 30 минут реакции уберите ледяную баню и продолжайте реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов. Отфильтруйте смолу и соберите фильтрат. Смолу промывают небольшим количеством трифторуксусной кислоты, фильтруют и фильтраты объединяют. Постепенно добавляйте фильтрат к 20 л ледяного эфира; образуется белый осадок. Центрифугируйте при 3000 об/мин для сбора осадка, пять раз промывайте ледяным эфиром и сушите при пониженном давлении с получением 10,3 г неочищенного пептида с чистотой по ВЭЖХ >90%.
